Каллусная ткань, как источник генетического разнообразия растений чая (CAMELLIA SINENSIS (L.) KUNTZE) в культуре IN VITRO

Для изучения генетического разнообразия сомаклонов чая, индуцированных из каллусной ткани, а также длительно культивируемых in vitro, были использованы 11 SSR- и 4 ISSR-праймеры. Ранее они были опробированы при генотипировании природных популяций чая in vivo и подтвердили свою эффективность. Амплификацию фрагментов полногеномной ДНК проводили методом ПЦР. Все SSR-праймеры показали отсутствие рецессивных аллелей – низкий уровень гетерозиготности у всех образцов и, как следствие, невысокий уровень полиморфизма праймеров, находящийся в пределах от 0 до 54 %. Наибольший полиморфизм отмечен у праймеров L40, L57, L07 и L20 и составил 54, 36, 36 и 34 %, соответственно. Амплифицированные SSR-фрагменты отличались размером в пределах 10 пар нуклеотидов, гетерозигот в популяции детектировано не было. Мультилокусные ISSR-праймеры показали более высокий уровень полиморфизма, который составил 40–52 %. Все сомаклоны, включённые в эксперимент, разделились на три кластера, было выявлено наличие генетических различий с коэффициентом отличий 0,05–0,1. Установлено, что в индуцированных из каллусной ткани растениях чая генетическая изменчивость, предположительно, носит точковый характер. Наибольшая изменчивость из всей группы обнаружена у образца № 16. Коллекция растений чая in vitro регулярно пополняется новыми соматическими клонами, которые индуцируются из каллусной ткани. На первом этапе они отбираются по фенотипическим признакам, в частности, по морфометрическим показателям, а затем изучаются на молекулярно-генетическом уровне (с привлечением ПЦР-анализа, метода цитометрии).